gibco胎牛血清熱滅活操作步驟:①選用與血清瓶同規(guī)格的對照瓶一個。
②對照瓶內放入與血清等體積的水。
③溫度預試。
對照瓶內插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(保證測試溫度的準確性),放入水浴箱中,接通電源,調節(jié)溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
④血清滅活。
血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56時, 定時30分鐘。
⑤大瓶血清滅活后,進行分裝。
⑥保存。
分裝后,抽樣做無菌試驗,-20~-70℃保存。
多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。
熱滅活一般是指在做免疫相關的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。
在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。
并且,熱滅活反而可能導致gibco胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。